Tulosta

Tutkimus:
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS- HERKISTYNEET SOLUT, GAMMAINTERFERONI, ERITYS, VERESTÄ

Luokitus:
Mikrobiologia

Käyttöönottopäivä:
10.5.2019

6173 • B -TbIFNg

Johdanto

B-TbIFNg on immunologinen tutkimusmenetelmä, jolla osoitetaan potilaan verestä M. tuberculosis antigeeneille herkistyneitä T-lymfosyyttejä, mittaamalla testissä stimuloituneiden solujen tuottamaa interferoni gammaa (IFNg) EIA-menetelmällä, kuitenkaan näitä soluja erikseen puhdistamatta (vrt. B-LyTbIFN, KL 6174, testi eristetyillä T- lymfosyyteillä).

Testin erityisnäyteputkissa (TB1 ja TB2-putket) on M. tuberculosis – bakteerille ominaisia proteiinipeptidejä (ESAT-6, CFP-10), joita ei ole rokotteena käytetyssä BCG-bakteerissa. Peptidit stimuloivat bakteerin aktivoimia T-lymfosyyttejä tuottamaan IFNg:tä. TB1-putkessa olevat antigeenipeptidit stimuloivat CD4+ ja TB2-putkessa olevat antigeenipeptidit CD8+ -T-lymfosyyttejä. IFNg-pitoisuus plasmafraktiosta mitataan EIA-menetelmällä. Tuotettu IFNg:n määrä on verrannollinen herkistyneiden lymfosyyttien määrään. Verinäytteen lymfosyyttien toimintakelpoisuuden osoituksena käytetään potilaan PHA-mitogeenilla stimuloituja soluja (MITOGEN-putki) ja negatiivisena kontrollina toimivat potilaan simuloimattomat solut (NIL-putki).

Indikaatiot

Mycobacterium tuberculosis -bakteerin aiheuttamat kliiniset ja subkliiniset infektiot, erityisesti vaikeasti diagnosoitavat ekstrapulmonaaliset muodot (luustopesäkkeet, lymfadeniitti), sekä latentin tuberkuloosi (LTBI) -infektion diagnostiikka esimerkiksi varotoimena ennen infektioriskiä lisäävän hoidon aloitusta.

Menetelmä on siihen tarvittavan pienen näytetilavuuden vuoksi erityisen sovelias lapsipotilaiden diagnostiikkaan sekä toisaalta tilanteissa, joissa ei voida käyttää tutkimusta B -LyTbIFN, KL 6174, jossa näyte tulee toimittaa tutkivaan laboratorioon 4 tunnin kuluessa.

HUOM! Haponkestävän sauvan värjäys ja viljely ovat edelleen ensisijaisia menetelmiä kliinisissä tuberkuloosi-infektioissa.

Lähete/tutkimuksen tilaaminen

ATK-pyyntö. Mikäli ei ole mahdollista tehdä pyyntöä atk:lle, täytetään yleislähete.
Hoitavan lääkärin tulee kirjoittaa lähetteeseen diagnoosin kannalta oleelliset seikat.

Näytteitä voidaan ottaa toimipisteissä maanantaista torstaihin (ei ennen arkipyhiä), kunhan varmistutaan siitä, että näyte ehtii käytännössä saman päivän aikana (16 tunnin sisään) Fimlabin keskuslaboratorion Käpy-työpisteeseen (Tampere, FM4, 3. krs, näytteiden vastaanotto) jatkokäsiteltäväksi. Kuljetus huoneenlämmössä. Mikäli erityistilanteissa näytettä suunnitellaan otettavaksi johonkin muuhun aikaan, näytteenotosta tulee informoida Fimlab:in Käpy-työpistettä puhelimitse (p. 03-31176536).

Näytteenottovälineiden tilaaminen ja aluenäytteenotto: materiaalit@fimlab.fi.

Näyte

Kokoverinäyte erikoisputkiin. 
Ottojärjestys:
1. Harmaa korkki – nollavertailuputki (NIL) 
2. Vihreä korkki – TB1-putki (TB1)
3. Keltainen korkki – TB2-putki (TB2)
4. Violetti korkki – mitogeeniputki (MITOGEN)
Näytettä tulee ottaa mustaan merkkiviivaan asti (vakuumiputkia). Putket sekoitetaan heti näytteenoton jälkeen kääntämällä niitä 8-10 kertaa ylösalaisin.

Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely

Veriputket säilytetään huoneenlämmössä, niitä ei saa laittaa jääkaapiin eikä pakastaa. Veriputket tulee toimittaa huoneenlämmössä käytännössä saman päivän aikana (16 tunnin sisään) Fimlabin keskuslaboratorion Käpy-työpisteeseen (Tampere, FM4, 3. krs, näytteiden vastaanotto) jatkokäsiteltäväksi. Käpy-työpisteessä putket on siirrettävä inkubaattoriin (+37 C) viimeistään 16 tunnin kuluttua näytteenotosta. 16-24 tunnin inkuboinnin jälkeen näytteet säilyvät kolme vuorokautta analysointikelpoisina huoneenlämmössä.

Menetelmä

Entsyymi-immunologinen menetelmä (EIA)

Tulos valmiina

Noin viikon kuluttua.

Viiteväli

  TB1 TB2  
Positiivinen ≥ 0.35 ≥ 0.35 IU/ml
Negatiivinen: < 0.35 < 0.35 IU/ml

 

Tulkinta

Tulokset ilmoitetaan IU/ml-yksikköinä. Positiivinen tulos (TB1 ja/tai TB2) viittaa M. tuberculosis kontaktiin, ja täten latenttiin tai aktiiviin tuberkuloosiin. Tulokseen liitetään lausunto.

Virhelähteet

M. tuberculosis -infektion lisäksi harvinaiset M. marinum, M. kansasii ja M. szulgai -infektiot voivat myös antaa positiivisen tuloksen spesifisillä peptideillä. Vahvasti immunosuprimoiduilla/kortisonia käyttävillä potilailla ja erittäin vaikeassa TB-taudissa negatiivinen tulos ei sulje pois infektion mahdollisuutta. Lymfopenian yhteydessä tulosten tulkinta on epävarmaa. Lymfopeniapotilailla B-LyTbIFN on kuitenkin suositeltavampi.

Lisätiedot

Huom! Vertaa B-LyTbIFN (Ly-TbSpot-tutkimus), jossa tehdään T-lymfosyyttien eristys. Ly-TbSpot-tutkimuksessa on eri näytteenottoputki kuin B -TbIFNg -tutkimuksessa.