Johdanto

Tutkimuksen tarkoitus on osoittaa mahdollinen malariainfektio. Ensimmäisestä näytteestä tehdään ilman erillistä pyyntöä malarian nukleiinihappo-osoitus ja keskussairaaloissa pikatesti. Lisäksi näytteet mikroskopoidaan Tampereen keskuslaboratoriossa ja Novassa tuloksen varmistamiseksi ja parasitemia-asteen määrittämiseksi.  

Malarian aiheuttaa Plasmodium-loisalkueläin, joka leviää Anopheles-sukuun kuuluvien naarashyttysten välityksellä. Malariaa ihmisissä aiheuttaa viisi eri Plasmodium-lajia: P. falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale ja P. knowlesi. Vaarallisimman malarian aiheuttaa yleisin malarialoinen P. falciparum, joka ilman hoitoa johtaa kuolemaan noin 20 %:ssa tapauksista. Lähes kaikki Afrikassa saadut malariatartunnat ovat falciparum-malariaa. Hyttysen pistäessä alkueläin kulkeutuu ensin maksaan ja sieltä edelleen veren punasoluihin. Alkueläin lisääntyy punasolujen sisällä aiheuttaen solujen hajoamista ja kliinisiä taudin oireita. P. vivax ja P. ovale saattavat piillä maksasoluissa kuukausia ja jopa vuosia, minkä vuoksi malaria saattaa puhjeta vasta pitkän ajan kuluttua matkalta paluusta. P. falciparum ja P. malariae sen sijaan eivät jää maksaan piileviksi.

Indikaatiot

Malariaepäily. Kuumeilu endeemiseltä alueelta tulleella. Todetun malarian seurantanäytteet: parasitemian häviäminen verestä hoidon myötä. 

Lähete/tutkimuksen tilaaminen

Sähköinen pyyntö ja vastataan ohjelman esittämiin kysymyksiin. TAYS:n ulkopuolelta tulevien näytteiden mukana tulee olla lähete, josta käy ilmi, missä tartunta on mahdollisesti saatu, oireet sekä lääkitys. Pyyntöihin tulee kirjata myös pyytävän yksikön puhelinnumero. 

Näyteastia

Sivelyvalmiste ja paksupisara:  kapillaariverestä tehtyjä Sysmex SP-slides laseja (4+4 kpl) 

Pikatesti/NhO-testi: 2 kpl (1 pikatestiä ja 1 NhO-testiä varten) EDTA-putki (K2) 5/3 ml tai EDTA-Microtainerputki 0,5 ml 

Näyte

Kapillaariverestä tehdään välittömästi (4 kpl) sivelyvalmisteita ja  (4 kpl)  paksupisaravalmisteita. Objektilaseina käytetään Sysmex SP-Slides -laseja, joissa on katkaistut kulmat

Paksupisaravalmiste: iso pisara verta otetaan objektilasille (Sysmex SP-Slides) ja sitä sekoitetaan lasisauvalla  tai objektilasin reunalla neliön muotoiselle alueelle (n. 2 x 2 cm) fibriiniverkon hajoittamiseksi noin 30 sekuntia. Veren paksuus on sopiva, kun siitä näkyy sanomalehden teksti juuri ja juuri läpi. Näytteet on kuivatettava hyvin. Paksupisaravalmisteita ei saa kiinnittää!

Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely

Hyvin kuivatetut sivelyvalmisteet ja paksupisaravalmisteet säilyvät viikkoja, lähetys huoneenlämmössä.

Pikatesti/NhO-näyte , EDTA-veri, säilytys jääkaappilämpötilassa 3 vrk, lähetys huoneenlämmössä.

Menetelmä

MGG-värjäys sivelyvalmisteesta.
Pikatesti: BinaxNow Malaria 
Malaria-NhO: Alethia Malaria

Tekotiheys

Pikatesti ja NhO-osoitus päivystyksenä. Mikroskopointi seuraavana päivänä. Taysin näytteitä mikroskopoidaan myös la-su. 

Tulos valmiina

Mikäli ensimmäinen näyte on malarian suhteen negatiivinen, mutta kliininen epäilys on vahva, suositellaan näyte toistamaan 6-12 välein 3-4 kertaa, mieluiten kuumepiikin aikana. Mikäli kolme näytettä on negatiivisia sekä pikatestillä/NhO-osoitukseella että mikroskopoiden, on malaria epätodennäköinen. 

TAYS : Näytteestä tehdään päivystyksenä NhO-osoitus ja lasit mikroskopoidaan. Mikäli NhO-testi on päivystyksenä positiivinen, tehdään myös pikatesti. Tällä saadaan tunnistettua mahdollinen P. falciparum-infektio. Kaikki positiiviset näytteet tai epäselvät tapaukset lähetetään edelleen referenssilaboratorioon (HUS) lajitunnistukseen. Negatiivisia näytteitä ei lähetetä. 

Nova ja Kanta-Häme: Näytteestä tehdään paikallisesti päivystyksenä pikatesti joka on valmis noin 2 tunnin sisällä näytteenotosta. Nova: mikroskopointi vastataan erikseen.

Mikäli näyte on piketestillä/NhO-osoituksella positiivisia jatkonäytteistä ei testejä enää uusita, vastataan ”Tutkimusta ei tehdä”.
Mikäli ensimmäinen näyte on negatiivinen, mahdollisista seurantanäytteistä testit uusitaan. 

Tulkinta

Sivelyvalmiste: Normaalisti parasiitteja ei valmisteessa havaita. Parasiitit näkyvät rengasrakenteina punasolujen sisällä. Infektoituneiden punasolujen %-osuudesta esitetään arvio. Malariakantojen tyypitys varmistetaan HUS:n Parasitologian yksikössä.

Pikatesti:Positiivisia vastauksia on kolme erilaista:

1) P. falciparum-antigeeni positiivinen.

2) Pan-malaria-antigeeni positiivinen. Tulos viittaa P. ovale- tai P. malariae- tai P. vivax- infektioon.

3) Sekä P. f.- että pan-malaria antigeeni positiivinen. Tulos viittaa ensisijaisesti P. falciparum-infektioon. Sekainfektio on mahdollinen.  

NhO-osoitus: Vastataan positiivinen tai negatiivinen. Testi tunnistaa kaikki viisi ihmiselle infektioita aiheuttavaa plasmodium-lajia mutta ei erottele niitä tuloksessa. 

Soitettavat hälyttävät tulokset

Kaikki positiiviset tulokset soitetaan tilaajalle.

Lisätiedot

Jos epäillään jotakin muuta veren parasiittia (esim. mikrofilariat) on mahdollista tehdä erillinen pyyntö yleislähetteellä. Näytemuoto näissä on sama kuin plasmodium-tutkimuksessa (Huom! 10 ml Li-hepariiniputki Edta:n sijaan + sively/paksupisaravalmiste).