Indikaatiot
Suositeltavat tutkimukset voidaan ryhmitellä seuraavasti:
1. Seulonta: Li-Solut, Li-Prot
Seulontatyyppisiä tilanteita ovat esim. röntgentutkimusten yhteydessä otetut likvorinäytteet tai päivystysaikaiset lievät oireistot.
2. Infektioepäily: Li-Solut, Li-BaktVi, Li-Laktaat, Li-Prot, (Li-Gluk)
Li-Diffi lasketaan automaattisesti, jos Li-leukosyyttejä on yli 20 x 106/l. Li-Gluk-tutkimuksia kannattaa pyytää poikkeustapauksissa, esim. tuberkuloosiepäilyissä.
3. Vuotoepäily: Li-Solut, Li-Prot, (Li-Spektri)
Solut voidaan laskea tarvittaessa kolmesta peräkkäisestä putkesta, jolloin pystytään erottamaan näytteenottoon liittyvä artefaktavuoto likvoritilassa olevasta verestä. Li-Spektriä käytetään pienen vuodon toteamiseen (kuvantamismenetelmän tulos negatiivinen). Mahdolliset ylimääräiset putket tulee merkitä selvästi.
4. Muut epäilyt ja seuranta:
Lääkäri erittelee pyynnöt (ks. Taulukko 1), kun kysymyksenasettelu on perusvaihtoehdoista poikkeava.
Lähete/tutkimuksen tilaaminen
Likvorin irtosolututkimuspyyntö tarvitsee näytteenottoindikaation ja kysymyksenasettelun, keskeiset tiedot anamneesista, statuksesta, laboratoriolöydöksistä ja tulkintaan vaikuttavasta hoidosta sekä näytteenottoon liittyvät havainnot.
Potilaan esivalmistelu
Pistoalueen desinfektio on suoritettava huolellisesti ihokontaminaation välttämiseksi.
Näyteastia
Kemian tutkimukset: (Li-Gluk, Li-Laktaat ja Li-Prot) likvoriputki (2. putki)
Hematologian tutkimukset: (Li-Solut ja Li-Blastit) likvoriputki (3. putki)
Mikrobiologian tutkimukset: (Li-BaktVi) likvoriputki (1. putki) 1 tippa huoneenlämpöiseen tioglykolaattiputkeen ja vähintään 0.5 ml tehdaspuhtaaseen putkeen. Lisäksi voidaan ottaa värjäystä varten tippa likvoria objektilasille (tarkemmat ohjeet ks. Bakteeri, viljely selkäydinnesteestä).
(Li-MikNhO) tehdaspuhtaaseen putkeen vähintään 0.2 ml.
Patologian tutkimukset: Li-Syto (Pirkanmaa, Kanta-Häme, Päijät-Häme): Selkäydinnesteen sytologisille soluille tarkoitettu näyteputki (putkessa 2 ml 96 % etanolia fiksatiivinä).
Patologian tutkimukset: Li-Syto (Keski-Suomi): Ks. paikallisen patologian laboratorion ohjeistus.
Näyte
Minimitilavuutta sovelletaan pieniin lapsiin tai kun normaalitilavuutta ei saada.
1. Putki 1 (Li-BaktVi, sisältää värjäyksen ja Li-MikNhO)
Tutkimusta Li-BaktVi varten likvoria otetaan 1 tippa huoneenlämpöiseen tioglykolaattiputkeen ja vähintään 0.5 ml tehdaspuhtaaseen putkeen.
(Lisäksi voidaan ottaa värjäystä varten tippa likvoria objektilasille).
Päijät-Häme: Tutkimusta Li-MikNhO varten likvoria otetaan lisäksi tehdaspuhtaaseen putkeen 0.5 ml (minimi 0.2 ml).
2. Putki 2 (Li-Gluk, Li-Laktaat, Li-Prot)
Suositeltava tilavuus 1 ml (16 tippaa), minimitilavuus 0.5 ml (8 tippaa). Näyte voidaan lähettää huoneenlämmössä, jos se saadaan putkipostilla tai muutoin toimitettua analysoitavaksi heti näytteenoton jälkeen.
3. Putki 3 (Li-Solut, Li-Blastit)
Suositeltava tilavuus 1 ml (16 tippaa), minimitilavuus 0.5 ml (8 tippaa). Näyte toimitetaan tutkittavaksi välittömästi näytteenoton jälkeen huoneenlämmössä (solut alkavat hajota jo puolen tunnin kuluttua näytteenotosta). Näyte säilyy huoneenlämmössä 1-2 tuntia.
4. Mahdolliset lisä-/erikoisputket
Li-Syto (Pirkanmaa, Kanta-Häme ja Päijät-Häme): 3 ml näytettä. Likvori lisätään erikoisputkeen, jossa on valmiina 2 ml 96% etanolifiksatiivia. Mahdollisesta makroskooppisesta artefaktaverestä on mainittava lähetteessä.
Li-Syto (Keski-Suomi): ks. paikallisen laboratorion ohjeistus
Erityistutkimusten näyteputket ja vaaditut tilavuudet on tarkistettava erikseen, ks. Taulukko 1.
Jokaisessa putkessa tulee olla potilaan tunnistetiedot, hoitoyksikkö, putken ottojärjestys, päivämäärä, kellonaika ja pyydetyt tutkimukset.
Taulukko 1. Selkäydinnestetutkimuksissa käytettävät lisä- ja erikoisputket:
Atk-n:o | Lyhenne | Tutkimuksen nimi | Tilavuus | Minimi | Huomautuksia | Putkijärj. |
1828 | -CrneAg | Cryptococcus neoformans, antigeeni | 1 ml | 0.5 ml | 1 | |
3508 | Pu-SienVi | Sieni, viljely (syväsieniviljely) | 1 ml | 0.5 ml | Sis. värjäyksen | 1 |
4437 | -TbEVi | Mycobacterium, erikoisviljely | 1 ml | 0.5 ml | Sis. värjäyksen | 1 |
4490 | -TbNhO | Mycobacterium Tuberculosis, nukleiinihappo (kval) | 1 ml | 1 ml | 1 | |
2975 | -VirVi | Virus, viljely | 2 ml | 1.5 ml | 1 | |
1715 | -CMVNh | Cytomegalo virus, nukleiinihappo, kvantitatiivinen | 1 ml | 1 ml | 1 | |
1730 | -ToxoNhO | Toxoplasma, nukleiinihapon osoittaminen | 1 ml | 0.5 ml | 2 | |
4404 | Li-HSVNhO | Herpes simplex virus, nukleiinihappo (kval) | 1 ml | 0.5 ml | 2 | |
3975 | Li-BorrAb | Borrelia, vasta-aineet | 1 ml | 0.5 ml | S | 2 |
4407 | Li-HSVAb | Herpes simplex virus, vasta-aineet | 1 ml | 0.3 ml | S | 2 |
4813 |
-HIVAgAb | HIV, antigeeni ja vasta-aineet | 1 ml | 0.5 ml | 2 | |
4749 | Li-CMVAb | Cytomegalo virus, vasta-aineet | 1 ml | 0.5 ml | S | 2 |
3450 | Li-IgGInd | Immunoglobuliini G, indeksi | 0.5 ml | 0.3 ml | S | 2 |
2287 | Li-LZM | Lysotsyymi | 2 ml | 1 ml | 3 | |
15001 | Li-Vara | Varanäyte | 2 ml | 1 ml | S | 4 |
6168 | Li-IgG-Oc | Immunoglobuliini G, oligoklonaalinen (isoelektrinen fokusointi) | 1 ml | 1 ml | S, (likvorin tulee olla kirkasta tähän tutkimukseen) | 5 |
3661 | Li-ADA | Adenosiinideaminaasi | 0.5 ml | 0.5 ml | 6 | |
3426 | Li-ACE | Angiotensiini-1-konvertaasi | 1 ml | 0.5 ml | 6 | |
2664 | Li-Spektri | Spektri (320 – 650 nm) | 1 ml | 0.5 ml | punainen putki tai folioon kääritty putki | 7 |
6236 | Li-HemaFc | Immunofenotyypitys, veritauti | 5 ml | 1 ml | Transfix-putki |
Lyhenteet: P = samanaikainen plasmanäyte; S = samanaikainen seeruminäyte 1 ml.
Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely
TAYS:n näytteet toimitetaan viipymättä Tampereen keskuslaboratorion näytteiden vastaanottoon. Päivystysaikana on syytä ilmoittaa näytteistä kemian laboratorion päivystäjille, p. 03 311 76536.
Hatanpään ja Kanta-Hämeen keskussairaalasta bakteriologiset näytteet lähetetään päiväaikaan mahdollisimman pian näytteenotosta Tampereen keskuslaboratorioon:
– arkipäivisin ma – pe klo 7.30 – 16.00, näytteestä ilmoitetaan märkäviljelyihin, p. 03 311 76552
– lauantaisin klo 7.30 – 15.00, näytteestä ilmoitetaan mikrobiologian päivystäjälle, p. 03 311 76571
– sunnuntaisin ja pyhäpäivinä klo 10.00 – 14.00, näytteestä ilmoitetaan mikrobiologian päivystäjälle, p. 03 311 76571
Iltaisin tai kun nopea kuljetus ei ole mahdollista, bakteriologisia näytteitä inkuboidaan + 35°C:ssa ennen lähettämistä.
Keski-Suomen keskussairaalassa näytteet toimitetaan viipymättä näytteiden vastaanottoon. Päivystysaikana on syytä ilmoittaa näytteistä laboratorion päivystäjälle, p. 014 269 1552
Li-Solut: Solut alkavat hajota jo puolen tunnin kuluessa näytteenotosta. Näyte toimitetaan välittömästi näytteenoton jälkeen laboratorioon huoneenlämmössä. Jotta näytteen vastausviivettä voidaan arvioida, tulee näyteputkesta käydä ilmi todellinen näytteenottoaika (merkittävä käsin tarraan, ellei tarraan tulostunut aika pidä paikkaansa).
Mikrobiologiset näytteet säilytetään + 35°C:ssa ennen lähettämistä ja ne eivät saa kuljetuksen aikana jäähtyä alle huoneenlämpötilan. Pyyntötarrat liimataan tioglykolaattiputken yläosaan (neste ei saa peittyä). (Objektilasin säilytys ja kuljetus huoneenlämmössä).
Menetelmä
Li-Gluk ja Li-Laktaat: Entsymaattinen
Li-Prot: Fotometria (biureettimenetelmä)
Li-Solut: Värjäämättömän näytteen kammiolaskenta. Veristen tai runsassoluisten näytteiden laskennassa voidaan käyttää myös automatisoitua solulaskentaa. Vastauksena ilmoitetaan Li-Eryt ja Li-Leuk. Mikäli Li-Leuk on yli 20 x 106/l, tehdään automaattisesti ilman eri pyyntöä erittelylaskenta (Li-Diffi).
Li-Diffi: Automatisoitu solulaskenta tai mikroskooppinen erittely. Erittelylaskennassa leukosyytit jaetaan kypsiin neutrofiilisiin ja eosinofiilisiin granulosyytteihin (Li-Neut+Eo), mononukleaarisiin soluihin (Li-Mononuk, joihin lasketaan lymfosyytit, monosyytit, makrofagit, blastit) sekä mahdollisiin muihin havattuihin soluihin (Li-MuutSol). Tulokset ilmoitetaan %-osuutena tumallisista soluista.
Li-Blastit: Mikroskooppinen erittely MGG-värjäyksen avulla
Mikrobiologian ja patologian tutkimukset: ks. kyseiset tutkimukset.
Tulos valmiina
Päivystystutkimuksena likvorista tehdään Li-Prot, Li-Laktaat (ja Li-Gluk) sekä Li-Solut (sis. Li-Diffi). Hätätapauksissa erikseen pyydettäessä tehdään myös Li-BaktVr. Muut selkäydinnesteen perustutkimukset tehdään arkipäivisin maanantaista perjantaihin.
Viiteväli
Li-Gluk: 2.2 – 4.2 mmol/l. Bakteerimeningiitissä likvorin glukoosipitoisuus yleensä laskee noin puoleen normaalista (alle 30 – 40 % plasmapitoisuudesta), purulentissa meningiitissä jopa lähelle nollatasoa.
Li-Laktaat: alle 2.7 mmol/l. Tutkimuksella pyritään erottelemaan bakteeri- ja virusperäistä meningiittiä. Laktaattipitoisuus nousee valtaosassa bakteerimeningiiteistä. Tulkintarajana virus- ja bakteerimeningiittien välillä on 3 – 4 mmol/l, jota suuremmat arvot viittaavat bakteerimeningiittiin.
Li-Prot: Viiteväli on iästä riippuva, ks. erillinen tutkimusohje 2514 Li-Prot.
Li-Eryt: 0-1 x 106/l. Likvorin punasolupitoisuus pysyy samana perättäisissä näytteissä, jos verta vuotaa likvortilaan. Artefaktavuodossa punasolupitoisuus laskee.
Li-Leuk: vastasyntyneillä (0 – 7 vrk ikäiset) 0-30 x 106/l, yli 7 vrk ikäiset 0 – 5 x 106/l. Suurempi määrä viittaa infektioon, ellei punasoluja ole yli 2000 x 106/l. Leukosytoosi yli 500 x 106/l viittaa bakteerimeningiittiin.
Li-Diffi: Tutkimus tehdään, kun Li-Leuk on yli 20 x 106/l. Tulokset ilmoitetaan %-osuutena tumallisista soluista. Neutrofiilien lisääntyminen likvorissa viittaa bakteeriperäiseen meningiittiin ja lymfosyyttien lisääntyminen virus- tai tuberkuloottiseen meningiittiin.
Tulkinta
Patologian tutkimuksista annetaan lausunto.
Virhelähteet
Potilaan paastoamattomuus saattaa kemiallisissa analyyseissa vaikuttaa määritetyn aineen pitoisuuteen. Kuljetusviive vähentää laktaattipitoisuutta sekä huonontaa solujen säilymistä, minkä takia näyte on toimitettava viipymättä laboratorioon (jotta kuljetusviivettä voidaan arvioida, tulee näytteestä käydä ilmi todellinen näytteenottoaika)
Lisätiedot
Päiväaikaisia tutkimuksia (kuten Li-Prot, Li-IgG-Oc ja Li-IgG-Ind) voidaan pyytää myös päivystysaikaan otetuista näytteistä, jolloin näyte analysoidaan myöhemmin.
Tutkimuslyhenne | Toimipisteet akkreditoinnin pätevyysalueella | Akkreditoitu |
---|---|---|
1470 | Li-Gluk | Ei | |
2186 | Li-Laktaat | Ei | |
2514 | Li-Prot | Ei | |
15001 | Li-Vara | Ei | |
2655 | Li-Solut | Ei | |
1190 | Li-Blastit | Ei | |
1154 | Li-BaktVi | Pirkanmaan keskuslaboratorio, Tampere FM4 | Kyllä |
4059 | Li-Syto | Pirkanmaan keskuslaboratorio, Tampere FM4 | Kyllä |
1470 | Li-Gluk | Ei | |
2186 | Li-Laktaat | Ei | |
2514 | Li-Prot | Ei | |
15001 | Li-Vara | Ei | |
2655 | Li-Solut | Ei | |
1190 | Li-Blastit | Ei | |
1154 | Li-BaktVi | Ei | |
4059 | Li-Syto | Ei | |