Johdanto
Hyytymistekijä VIII muodostaa plasmassa von Willebrand -tekijän kanssa kompleksin. Kyseisten tekijöiden tasot nousevat akuutin faasin reaktioissa. F VIII:n hyytymisaktiivisuus on alentunut tai puuttuu A-hemofiliassa sekä vaikeassa (joskus keskivaikeassakin) von Willebrandin taudissa.
A-hemofiliapotilaiden hyytymistekijäkorvaushoidoissa käytetään joko plasmaperäisiä valmisteita tai rekombinanttivalmisteita. Rekombinantti FVIII -valmisteita (esim. Advate, Adynovi, Afstyla, Elocta, Kovaltry, Novoeight, Nuwiq) saavien potilaiden hoitovastetta suositellaan seurattavaksi kromogeeniseen menetelmään perustuvalla FVIII-määrityksellä (FVIIIRe). Erityisesti joidenkin uusien pitkävaikutteisten FVIII-rekombinanttivalmisteiden korvaushoidon seurannassa kromogeenisella määrityksellä saadaan luotettavampia tuloksia.
Kromogeenistä määritystä voidaan myös tarvittaessa käyttää FVIII-one stage -menetelmän rinnalla potilaan vuototaipumusta selvitettäessä. Jotkut mutaatiot voivat aiheuttaa lievän A-hemofilian, jossa FVIII-taso voi olla alentunut vain toisella menetelmällä mitattuna.
Indikaatiot
Hyytymishäiriöiden selvittely. F VIII -korvaushoidon seuranta.
P-FVIII : A-hemofilian ja von Willebrandin taudin diagnostiikka. A-hemofilian plasmaperäisen korvaushoidon seuranta. Tukostaipumuksen selvittely.
P-FVIIIRe: F VIII -korvaushoidon (rekombinanttivalmisteet) seuranta. Korvaushoidossa käytettävän valmisteen nimi pitää aina ilmoittaa lähetteessä.
Lähete/tutkimuksen tilaaminen
Sähköinen pyyntö tai Hyytymistutkimukset lähete / Remiss for koagulationsundersokning Huslab. Lähetteellä on ilmoitettava A-hemofilian hoidossa käytetyn valmisteen nimi sekä muut hyytymistä edistävät lääkkeet (myös OctaplasLG) ja mahdollinen antikoagulaatiohoito. Huom! Tampereen keskuslaboratoriossa tehdään 24/7 päivystystutkimusta 16244 P -F8paiv. Katso tarkemmin ohjekirja.
Hoitoyksikön on sovittava päivystysnäytteiden lähettämisestä lähettävän laboratorion kanssa:
Hämeenlinna: p. 041 732 0865 (päivystysaikana p. 041 732 0860)
Jyväskylä: Lähtevät näytteet ma-pe klo 8-16 p. 014 2692351 / 050 309 6297 ja muina aikoina p. 014 2691552
Lahti: Näytteiden lajittelu ja lähetys p. 041 731 3775
Tampere: FM4, Lähtevät näytteet ma-pe 8 ‐ 15 p. 03 311 76487 ja muina aikoina p. 03 311 76536
Vaasa: Lähtevät näytteet ma-pe 8-15 p. 06 213 2523 ja muina aikoina p. 06 213 2520
Näyteastia
Hukkaputki: lisäaineeton putki 5/4 ml tai hyytymistekijäputki 5/2,7 ml tai 5/2 ml (vastasyntyneillä hyytymistekijäputki 5/1 ml)
Hyytymistekijäputki: Na-sitraatti 3.2%, 0.109M; 5/2,7 ml (pikkulapsilla mikroputki 1.0 ml)
Näyte
Hukkanäyte: 2 ml verta lisäaineettomaan tai sitraattiputkeen (vastasyntyneillä 1 ml, keskosista hukkanäytettä ei oteta)
Varsinainen näyte:
FVIII: 2,7 ml verta sitraattiputkeen merkityn täyttöasteen mukaan (pikkulapsilla vähintään 1 ml)
FVIIIRe: 2×2.7 ml verta sitraattiputkeen merkityn täyttöasteen mukaan (pikkulapsilla vähintään 1 ml)
Napasuoninäyte vastasyntyneeltä: 2,7 ml napaverta sitraattiputkeen merkityn täyttöasteen mukaan. Näyte otetaan valuttamalla (ei ruiskuun). Putki on sekoitettava välittömästi näytteenoton jälkeen kääntämällä muutamia kertoja. Jos napasuoninäyte ei onnistu, otetaan näyte lapsesta pienellä neulalla perifeerisestä verestä 1 ml hyytymistekijäputkeen. Pistokohtaa tulee painaa vähintään 10 minuuttia. Hyväkuntoiselta lapselta suoninäytettä ei tarvitse ottaa vielä synnytyssalissa. Napasuoninäytteen lähettämisestä ja tutkimisesta tulee sopia erikseen: päivystysaikana Fimlab Tampere 24/7 p. 03 311 76536.
Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely
Näyte säilyy erottelematta huoneenlämmössä 8 tuntia. Pakkaa näytteet kuljetuksen ajaksi hemostaasinäytteille tarkoitettuun kuljetuspakkaukseen tai muuhun vastaavaan pakkaukseen, joka eristää näytteet lämpötilavaihteluilta.
Jos näytettä ei toimiteta analysoitavaksi 8 tunnin kuluessa, se on sentrifugoitava (2500 g 15 min), plasma eroteltava kahteen polypropeeniputkeen ja lähetettävä pakastettuna. Jaa lasten plasma niin moneen eppendorf-putkeen kuin näytettä riittää (vähintään 300 μl/putki).
Näytteitä voidaan käsitellä ja pakastaa Fimlabin Tampereen, Jyväskylän, Lahden ja Vaasan keskuslaboratorioissa.
Menetelmä
P -FVIII: Hyytymisaikaan perustuva mittaus
P -FVIIIRe: Fotometrinen
Tekotiheys
Päivittäin
Tulos valmiina
1-3 arkipäivän kuluessa
Viiteväli
P -FVIII (B-Trombot-paketissa ja yksittäin tilattuna): 70 – 160 % (aikuiset)*
P -FVIII (P-Vuotot paketissa): 59 – 131 % (aikuiset)
*Viiteväli vaihtunut 4.3.2025 tekopaikka- ja menetelmämuutoksen vuoksi.
Tulkinta
Vuototaipumus ja pieni F VIII -aktiivisuus kahdessa eri näytteessä ainoana poikkeavuutena sekä normaali von Willebrand -tekijän aktiivisuus on diagnostinen A-hemofilialle. Positiivinen sukuanamneesi tukee diagnoosia. Vaikeassa A-hemofiliassa F VIII -aktiivisuus on yleensä alle 1 % (<0,01 IU/ml), keskivaikeassa 1 – 5 % (0,01 – 0,05 IU/ml) ja lievässä yli 5 % (>0,05 IU/ml). Harvinaisissa tapauksissa myös periytyvää verenvuototautia sairastamattomille henkilöille voi mudostua hyytymistekijän aktiivisuutta heikentäviä autovasta-aineita (hankinnainen hemofilia).
Kohonnut hyytymistekijä VIII-aktiivisuus (taso >190%) on laskimo- ja valtimotukosten riskitekijä. Tutkimus sisältyy tromboositaipumuksen selvittelyyn (4569 B-Trombot). Tulkinnassa on huomioitava, että FVIII kuuluu akuutin faasin proteiineihin ja nousee mm. tulehdusten, maksasairauden, syöpäsairauden, fyysisen rasituksen, kortisonihoidon ja akuutin tukoksen yhteydessä. Myös raskauden aikana FVIII-taso on fysiologisesti tavanomaista korkeampi. Voimakkaan antikoagulaatiohoidon (hepariinit, trombiinin esto, FXa-esto) aikana FVIII aktiivisuus tyypillisesti laskee. Hepariiniresistenssin yhtenä merkittävänä riskitekijänä on suuri FVIII-pitoisuus (>200%). Koholla oleva FVIII-aktiivisuus on yleensä hankinnainen tukosalttiutta lisäävä riskitekijä, mutta muutos voi olla myös pysyvä, taustaltaan geneettinen. Lähisukulaisten tutkimukset eivät kuitenkaan ole aiheellisia.
Virhelähteet
Hepariini ja suorat oraaliset antikoagulantit (esim. dabigatraani, rivaroksabaani, apiksabaani ja edoksabaani) voivat aiheuttaa virheellisen matalan tuloksen F VIII -aktiivisuusmäärityksessä.
Näytteen säilyttäminen tai kuljettaminen kylmässä (<8 °C) ennen näytteen analysointia tai käsittelyä ja pakastamista voi aiheuttaa virheellisen matalia tuloksia von Willebrand -tekijän määrityksissä.